100

Выпуклый

Линейный

Ступенчатый Вогнутый

Рис. 5.3-3. Форма градиента для бинарного элюеата, состоящего из метанола и воды.

О

Время

через мембранный фильтр под вакуумом. Растворенные газы, такие, как азот и кислород, могут также быть удалены пропусканием инертного газа (например, гелия) или выдерживанием в ультразвуковой бане.

Существуют два вида элюирования — изократическое и градиентное. При изократическом методе работают с одним растворителем постоянного состава, например, 30% метанола и 70% воды. Лучшее разделение достигается с использованием градиентного элюирования. При этом состав элюента непрерывно изменяется по определенной программе. Обычно используют растворители различной полярности. Например, в водно-метанольном элюенте доля метанола увеличивается с 30 до 70% (об.) линейно или по другой программе (см. рис. 5.3-3). Эффект градиента растворителя сравним с эффектом температурного градиента, известного в ГХ. Достигается сокращение времени анализа, а пики можно обрабатывать с одинаковой точностью по всей хроматограмме.

Насосные системы

К насосам для ВЭЖХ предъявляются следующие требования:

— генерация давления до 15 МПа;

— слабые остаточные пульсации;

— химическая стойкость;

— обеспечение скорости потока от 0,1 до Ю мл/мин;

— воспроизводимость и контроль скорости потока с относительной погрешностью не более 0,5%.

Для изготовления насосов применяются нержавеющая сталь, тефлон, керамика. Стойкость к давлению обеспечивается сапфировыми клапанами. Существуют вытеснительные и возвратно-поступательные насосы. Вытеснительные насосы работают по принципу шприца, поэтому называются также шпри-цевыми. Около 200 мл подвижной фазы всасывается внутрь и выдавливается без пульсаций в хроматографическую систему. Такие насосы, однако, имеют серьезный недостаток — прерывание подачи подвижной фазы для заполнении цилиндра и промывки поршня. Вытеснительные насосы и сегодня используются в микроколоночной ВЭЖХ, поскольку в этом виде хроматографии требуются небольшие расходы подвижной фазы, но в основном в настоящее время ис-

Copyright © 2007-2012 Zomber.Ru

Использование материалов сайта возможно при условии указания активной ссылки
Решить химию