Заполнение колонок частицами размером менее 20 мкм является отдельной проблемой. Высокая поверхностная энергия сорбента и связанный с ней электростатический заряд не позволяют проводить сухое заполнение. При заполнении колонок с помощью жидкости следует избегать градиента размера частиц в колонке за счет седиментации.

Для заполнения колонки сорбент суспендируется в жидкости. Для заполнения колонок: сорбентами с обращенными фазами может быть использован метанол. Еще лучших результатов можно достичь с использованием плавающих суспензий. При этом разница в плотностях твердой фазы и жидкости компенсируется специфически выбираемой диспергирующей жидкостью, такой, как дибром метан.

□ Плавающие суспензии—особый аид суспензии твердого вещества а жидкости (например, «жидкая» глина).

Детекторы

Для детектирования в ВЭЖХ существуют два варианта:

L. Измерение общей характеристики подвижной фазы, например показателя преломления или электропроводности. В этом случае детектируемое вещество измеряется косвенно по изменению характеристики подвижной фазы.

2. Измерение характеристики самого детектируемого вещества, например его УФ-поглощения, флуоресценции или диффузионного тока на электроде.

□ Детекторы в ВЭЖХ могут быть разделены на детекторы общих свойств, например, рефрактометрический детектор, и детекторы свойств определяемого соединеныя, например, УФ-детектор.

УФ-детектор наиболее часто используется, детектирование с его помощью составляет свыше 70% случаев.

Абсорбционные детекторы

Чтобы измерить светопоглощение элюента на выходе из колонки, используют проточную ячейку. Устройство жидкостной проточной ячейки Z-образной формы изображено на рис. 5.3-6. Для уменьшения размывания пиков размер ячейки делают минимальным — от 1 до 10 мкл. Длина оптического пути колеблется от 2 до 10 мм. Для измерений в УФ-диапазоне оптические окна ячейки должны быть сделаны из кварца.

Наиболее простой вариант УФ-детекторов — фильтровые фотометры. В этом случае из света ртутной лампы выделяется эмиссионная линия и она используется для детектирования. Обычно используют линии 254 нм, поскольку все ароматические соединения имеют максимум поглощения при этой длине волны и большинство органических, а также неорганических веществ поглощают в этой спектральной области.

Детектор с изменяемой дляной волны может работать и iron одной длине волны, которая задается при помощи решеточного или призменного монохро-матора аналогично сканирующему фотометру.

Copyright © 2007-2012 Zomber.Ru

Использование материалов сайта возможно при условии указания активной ссылки
Решить химию