Главная страница сайта Услуги решения задач по химии
Лекции по химии Учебник - общая химия


В галь-фпмътрационной хроматографии проводят разделение водорастворимых веществ на гидрофильных сорбентах. При этом используются водные элюенты, содержащие, как правило, буфер для контроля уровня рН. В гель-проникающей хроматографии применяются гидрофобные сорбенты и соответственно неполярные органические растворители, такие, как тетрагидрофуран, дихлорметан или толуол. С помощью гель-проникающей хроматографии определяют соединения, малорастворимые в воде.

Детекторы

Детектирование в гель-хроматографин можно осуществлять с помощью детекторов, с откликом, пропорциональным концентрации (например, дифференциальный рефрактометрический или фотометрический детекторы в УФ-или ИК- области спектра).

.Проточный вискозиметр обычно используют в качестве специального детектора для высокомолекулярных веществ. При этом измеряется фоновая вязкость элюента. При прохождении через детектор определяемого высокомолекулярного соединения вязкость возрастает и результирующий сигнал регистрируется в виде пика.

Применение

Гель-хроматография служит для определения веществ с относительной молекулярной массой более 2000, причем гель-фильтрационная хроматография применяется для разделения водорастворимых соединений, а гель-проникающая — для разделения водонерастворимых соединений.

В случае гель-фильтрации отделяют, например, природные высокомолекулярные вещества от более низкомолекулярных соединений или от солей. Таким образом белки могут быть отделены от аминокислот или более низкомолекулярных пептидов, если эксклюзионный предел сорбента составляет несколько тысяч дальтон (см. табл. 5.3-4).

Гель-проникающая хроматография служит для разделения гомологов и олигомеров, например, жирных кислот с относительной молекулярной массой между 100 и 350. Для этого выбирают смолы с эксклюзионным пределом около 1000.

Оба вида гель-хроматографии могут быть использованы для нахождения молекулярных масс или определения распределения по молекулярным массам природных соединений или полимеров.

Молекулярные массы компонентов пробы находят на основе стандартных соединений, имеющих характеристики, близкие к характеристикам определяемых компонентов. Основой градуировки является логарифмическая зависимость между объемом элюирования и относительной молекулярной массой МТ (см. рис. 5.3-19,6). Эта зависимость может быть аппроксимирована в средней части диапазона прямой линией:

lgMr^&o-fciJgVk (5-3-9)

где 6о и ©1 — регрессионные параметры, a Ve — объем элюирования (удерживания).



 

Вернуться в меню книги (стр. 201-300)

 

Решаем контрольные работы по химии
Срочно нужно решить задачи по химии, выполнить контрольную работу или написать реферат? Тогда вам сюда.

 

Copyright © 2007-2012 Zomber.Ru

Использование материалов сайта возможно при условии указания активной ссылки
Решить химию