анионов. Изредка их также применяют для определения реагентов (например, Н2О2), участвующих в индикаторной реакции. В любом случае основным приложением данных методов является высокочувствительное определение катализаторов (пределы обнаружения обычно лежат в диапазоне 10~9-10~7 М, но иногда достигают значений 10~12~10-10М). Столь высокая чувствительность может быть дополнительно улучшена при использовании активатора, что часто применяется в практике кинетических аналитических определений.

Другой путь увеличения чувствительности существующих каталитических методов определения — использование мицеллярных сред. Мицеллярный (имеющий физическую природу) и химический катализ сочетают в целом ряде методов, чувствительность которых повышается практически на порядок по сравнению с определением в водной среде. Данный эффект объясняется различными механизмами, в частности, концентрированием катализатора на поверхности мицелл при образовании комплекса с одним из реагентов, участвующих в индикаторной реакции [6.3-5].

□ Кинетические методы можно использовать для определения субстрата в ферментативной реакции.

Ферментативные каталитические реакции применяют для определения субстратов чаще, чем для определения самих ферментов (их активности). Помимо высокой чувствительности ферментативного определения субстратов (а также других веществ при их косвенном определении) подходящий фермент обеспечивает высокую селективность определения. Определение субстратов базируется на использовании уравнения 6.3-17, но при этом величина [S] должна быть существенно ниже, чем Км- Тогда уравнение упрощается:

,,0 = M§k[S] = ^ = *:'[S] (6.3-24)

Полученное выражение является уравнением реакции первого порядка (рис. 6.3-2). Из ур. 6.3-24 непосредственно вытекает, что скорость соермента-тивной реакции пропорциональна концентрации субстрата при данной неизменной концентрации срермента, а значит, можно успешно использовать описанные выше методы начальных скоростей (тангенсов), фиксированного времени и фиксированной концентрации. Для выполнения этого условия на практике отношение [SJ/Км не должно превышать 0,2, а еще лучше, чтобы оно было ниже 0,05. При постоянной концентрации субстрата скорость реакции будет пропорциональна концентрации фермента, как показывает уравнение 6.3-24.

Кинетические определения металлов-катализаторов (и других веществ), соединений и ферментов столь многочисленны, что здесь невозможно привести даже их краткий обзор. Мы отсылаем читателя, интересующегося определением металлов-катализаторов, к монографиям, приведенным в разд. 6.1, и нескольким обзорам [6.3-7, 6.3-8]. Литература о ферментативных реакциях весьма многочисленна и хорошо известна.

Copyright © 2007-2012 Zomber.Ru

Использование материалов сайта возможно при условии указания активной ссылки
Решить химию