и общая концентрация метки в иммобилизованной фазе равна

[I^„J==[AL] + [L] (7.8-20)

тогда

И_ [Ьобщ] гдт1 _ ^[А][Ьобщ]

-1 + ЛГ[А] И |AL]- 1 + ЛГ[А] (78_21)

»4М - w-ifeJiW

□ Если аналитическую реакцию можно описать как обратимое равновесие, то в результате аналитический сигнал не будет линейным.

Эти уравнения подразумевают, что отклик на определяемое вещество может не быть линейным во всем интересующем диапазоне концентраций. При анализе растворов в объеме эту проблему часто преодолевают, подбирая количество используемой метки таким образом, чтобы ее реакция с определяемым веществом попадала в диапазон, где сигнал пропорционален концентрации L или AL, в зависимости от того, какое из них вызывает оптический сигнал (например, для измерения [AL] должно быть [Ьобщ] ^> [AL]). В противоположность этому, в иммобилизованной фазе обычно более сложно манипулировать концентрацией, чтобы попасть в этот диапазон. Вместо этого можно предложить сравнение двух длин волн, где [AL] и [L] имеют различное поглощение, дающее отношение, не зависящее от [Ьобщ]:

^ = *[А] (7.8-23)

Второй способ заключается в использовании меток как «пассивных» индикаторов. Существует несколько типов сенсоров, в которых можно использовать метки таким образом. Например, в простом конкурентном связывающем анализе в растворе отклик можно моделировать с помощью следующих двух равновесий: во-первых, между антителом или связывающим белком (Bp) н определяемым веществом (А), и, во-вторых, между антителом или связывающим белком и меченым аналогом определяемого вещества (а*):

А + Вр*А:Вр, *A = jg| (7.8-24)

а'+ Bp ^ a': Bp, = gig (7.8-25)

□ Сенсор должен быть способен различать реагенты из правой и левой частей ревновесия.

Следует ожидать, что эти равновесия будут сохраняться и при иммобилизации Bp, если константы относительного сродства Ка и Кь~ не зависят от концентрации и ограничений, накладываемых Иммобилизацией на реакцию с

Copyright © 2007-2012 Zomber.Ru

Использование материалов сайта возможно при условии указания активной ссылки
Решить химию