Аналитическая химия. Проблемы и подходы. Р. Кельнер

Схема 7.8-17. Использование бактериальных люцифераз в определении этанола для получения в возбужденном состоянии комплекса с восстановленным кофактором флавина (FMNH2).

меченый и немеченый комплексы обычно разделяются — разделяют фазы или используют хроматографию. Затем анализ следует модели связывания белок — определяемое вещество (уравнения с 7.8-24 по 7.8-31), в которой метка наиболее часто является ферментом, а окраска развивается на последующих этапах реакции-

В принципе, можно усовершенствовать эти общие системы, чтобы получать более количественный результат в тех случаях, когда от анализа требуется больше, чем положительный или отрицательный ответ. Конфигурация сенсора зависит от того, какой вид анализа предпочтителен: конкурентный или сандвичевый. Теоретически особенно жизненной альтернативой кажется конкурентное смещение флуоресцентной метки. Так как это равновесный процесс, то загрязнения или примеси на поверхности не должны изменять абсолютного результата, хотя вполне возможно влияние на отношение сигнал/шум [7.8-50]. Вероятным недостатком является то, что успех такого анализа со смещением очень сильно зависит от относительной кинетики связывания соединения с меткой и пробой. Для получения количественного результата они должны значительно различаться.

Общим фактором во всех этих определениях является то, что эффективность измерения зависит от этапа разделения: две формы метки должны быть отделены физически одна от другой, чтобы анализ мог их различить. Одним из способов добиться такого разделения служит проведение реакции в «мертвом объеме» сенсора, при этом измерение выполняют в определенной зоне детектирования. Такое устройство можно создать, используя ячейку с двумя отделениями: биораспознающий реагент (например, связывающий белок) иммобилизуют в одном отделении, т. е. в мертвом объеме, тогда как метка и определяемое вещество перемещаются между двумя отделениями. Определение тогда зависит от того, в правильном ли месте расположена зона детектирования.

Решаем контрольные работы по химии
Срочно нужно решить задачи по химии, выполнить контрольную работу или написать реферат? Тогда вам сюда.

Использование материалов сайта возможно при условии указания активной ссылки
Решить химию

Главная страница сайта	Услуги решения задач по химии
Лекции по химии	Учебник - общая химия