□ Эффективность измерения зависит от возможности разделить связанную и свободную метки.

Естественная зона детектирования образована приемным конусом на конце световода (рис. 7.8-15,а). Типичный сенсор, таким образом, может использовать два световода, чтобы направлять свет к отдаленному концу, где происходит аналитическая химическая реакция, и обратно от него [7.8-51]. Оптические волокна имеют эффективное поле зрения, описываемое численной апертурой (NA) волокна, и, как можно видеть из рис. 7.8-15,в, чем больше NA, тем больше поле зрения. В описываемой выше конфигурации с двумя световодами неправильный выбор NA может привести к большому «мертвому объему» (рис. 7.8-15,6), который, очевидно, будет уменьшать измеряемый сигнал. Тем не менее, фокусировку поля для получения видимого и мертвого объемов можно использовать как преимущество в конкурентном анализе (рис. 7.8-16), где связывающий белок (Bp) иммобилизован в мертвом объеме, а проба (А) и меченый аналог (а*) конкурируют за места связывания, оставляя несвязанный а* диффундировать в облучаемый объем, где его и определяют.

Рис. 7.8-15. а — поле зрения в среде пробы на конце световода как функция численной апертуры (NA); б — поле детектирования в пробе при использовании двух смежных световодов для возбуждения и детектирования.

Приемный конус

NA

0.1 S

•200 мкм-»»•

Рис. 7.8-16. Иммобилизация связывающего белка в «мертвом объеме» для конкурентного анализа.

Область наблюдения

Copyright © 2007-2012 Zomber.Ru

Использование материалов сайта возможно при условии указания активной ссылки
Решить химию