| Главная страница сайта | Услуги решения задач по химии |
| Лекции по химии | Учебник - общая химия |
Пример
Конканавалин А (ConА, т. е. Bp в приведенной выше модели) был связан на полой диализной трубке, установленной на конце световода в мертвом объеме (рис. 7.8-16) |7.8-52]. Оценка величины [Вробщ], основанная на загрузке на единицу объема трубки, дает 10 мМ. Световод имел внутренний диаметр 100 мкм и численную апертуру 0,3. Для диализной трубки с внутренним диаметром 200 мкм длина мертвого объема составила ~ 0,2мм. Раствор декстрана (а*6щ), меченного FITC, заполнял световод с общей концентрацией [а*6щ] = 1,5мМ. Сенсор был, таким образом, «заряжен» для использования. Глюкозу (А) вводили за счет диффузии в диализную трубку, что приводило к конкурентному вытеснению декстрана (а*) сСопА (Ка = 3,2-102М-1; Кл- = 7,5104М-1). В табл. 7.8-3 приведено значение сигнала флуоресценции, связанной с а* и измеренной в относительных единицах с помощью фотодиодного детектора. Из экспериментальной градуировки можно оценить максимальный сигнал (для [а*] = [а*6щ] = 1,5мМ) и, таким образом, получить [а*]/[а*6щ].
Таблица 7.8-3. Данные по конкурентному определению глюкозы с «мертвым объемом»
|
Глюкоза (А), мМ |
Свободный декстран (а*), отн. ед. |
Общий декстран Кбщ)> оти- ед- |
Свободный декстран (рассч.), мМ |
|
|
2,5 |
2,4 |
13 |
0,185 |
0,28 |
|
5,0 |
2,9 |
13 |
0,223 |
0,34 |
|
7,5 |
3,5 |
13 |
0,269 |
0,40 |
|
10,0 |
4,2 |
13 |
0,323 |
0,48 |
|
12,5 |
5,1 |
13 |
0,392 |
0,59 |
|
15,0 |
6,1 |
13 |
0,469 |
0,70 |
|
17,5 |
6,7 |
13 |
0,515 |
0,77 |
|
20,0 |
7,2 |
13 |
0,554 |
0,83 |
|
22,5 |
7,5 |
13 |
0,577 |
0,86 |
|
25,0 |
8,1 |
13 |
0,623 |
0,93 |
|
27,5 |
8,3 |
13 |
0,638 |
0,96 |
|
30,0 |
8,7 |
13 |
0,669 |
1,00 |
|
32,5 |
8,9 |
13 |
0,685 |
1,03 |
|
35,0 |
9,0 |
13 |
0,692 |
1,04 |
|
37,5 |
9,3 |
13 |
0,715 |
1,07 |
|
40,0 |
9,4 |
13 |
0,723 |
1,08 |
|
42,5 |
9,5 |
13 |
0,731 |
1,10 |
|
45,0 |
9,6 |
13 |
0,738 |
1,11 |
Построив график зависимости флуоресцентного сигнала от концентрации глюкозы (рис. 7.8-17,а), обнаружим, что при [А0бщ] > 20мМ концентрация а* становится нечувствительной к изменению [Аобщ]-, Рис. 7.8-17,е предсказывает величину сигнала на основе уравнений 7.8-30 и 7.8-31 и приведенных выше значений [а*0бщ], Ка», Ка и [Вр0бщ1- Можно видеть, что предсказанный диапазон для сенсора составляет ~ 0,5 мМ глюкозы. Ряд факторов могут давать вклад в столь значительное отклонение. Модель основана на гомогенной реакции. Ранее в разделе «Теоретические основы планирования иммобилизации» (см. с. 522) было отмечено, что гетерогенные реакции, включая взаимодействия на поверхности, имеют кинетику, которая может быть функцией заполнения поверхности, и что на Кв.» и К а, вероятно, оказывает влияние общая концентрация сахара ([а*6щ] + [А„бщ]). Модель также должна рас-
|
Решаем контрольные работы по химии |
Copyright © 2007-2012 Zomber.Ru
Использование материалов сайта возможно при условии указания активной ссылки
Решить химию