Главная страница сайта | Услуги решения задач по химии |
Лекции по химии | Учебник - общая химия |
Таблица 7.9-3. Флуореаиэнтные свойства некоторых флуоресцентных меток, используемых в иммунном анализе
Флуорофор |
^фяуорт ***** |
Время затухания, НС |
Молярное поглощение, л/моль |
Квантовый выход |
|
Флуоресцеин |
492 |
520 |
4,5 |
72000 |
0,85 |
Родамин С изотиоцианат |
550 |
585 |
3,0 |
103000 |
0,7 |
Лиссамин сульфоро- |
|||||
дамин С хлорид |
530; 565 |
595 |
1,0 |
||
Анилинонафталин— сульфокислота |
38S |
471 |
16 |
0,8 |
|
2-Метокси-2,4-дифенил- |
|||||
3(2Н)фуранон |
390 |
430 |
0,1 |
||
Метилумбеллиферои |
323 |
386 |
16О00 |
||
Дансил хлорид |
340 |
480-520 |
14 |
0,3 |
|
Люцифер желтый |
430 |
540 |
3,3 |
13000 |
0,2 |
Эритрозин |
492 |
517 |
108 |
1О1О00 |
0,01 |
Ru-{dipy)3 |
450 |
625 |
250-500 |
14000 |
0,028 |
Pd-Копропорфирин |
396 |
618 |
700000 |
200000 |
0,17 |
Пирены |
346 |
395 |
16000 |
||
Техас красный |
596 |
615 |
80000 |
0,3 |
|
Эозин |
520 |
545 |
101000 |
||
Флуорескамин |
394 |
475 |
7,0 |
0,1 |
|
Хлорофилл |
430-453 |
648-669 |
сильную флуоресценцию при 400 нм, которые меняют величину и положение при связывании с белком и/или подложкой. Эти мешающие соединения имеют относительно малые времена затухания, так что метод, пригодный для разделения сигналов метки и фона, должен использовать измерение флуоресценции с временным разрешением (см. рис. 7.9-11).
Для этой цели оказались полезными некоторые комплексы лантаноидов с определенными органическими лигандами, такие, как хелаты европия со сток-совым сдвигом более 200 нм и временами затухания свыше 500не, в частности, потому, что возможный квантовый выход составляет 30-100%. Эти хелаты использовали разными способами; например, нефлуоресцирующие лиганды, об-разующие комплексы с европием, можно использовать как метку, а флуоресценция, возникающая при добавлении европия, возникает по окончании имму-нокомплексообразующей стадии анализа. Ион Еи3+ в растворе гидратирован восемью или девятью молекулами воды. В этом состоянии он проявляет только слабую флуоресценцию, но удаление этих молекул воды при комплексообразо-вании с органическими лигандами усиливает флуоресценцию Еи3+. В течение времени жизни возбужденного состояния молекула может также принимать участие в химической реакции, передавая, таким образом, энергию другим частицам и возвращаясь в основное состояние. Такой процесс тушения вызывает значительные потери сигнала.
Этот эффект тушения может также найти полезное применение в ерлуо-ресцентном иммунном анализе с передачей возбуждения. В принципе, не тре-
|
Решаем контрольные работы по химии |
Copyright © 2007-2012 Zomber.Ru
Использование материалов сайта возможно при условии указания активной ссылки
Решить химию