Хемилюминесцентные метки испускают свет за счет неустойчивого люминес-цирующего продукта реакции.

Б отличие от флуорофоров, хемилюминесцентные реагенты не требуют для возбуждения падающего света, а испускают свет в результате химической реакции. Например, арилакридиновые эфиры, присоединенные к рецепторной молекуле через эфирную часть, могут разорвать эфирную связь за счет щелочного гидролиза на одной из стадий анализа с образованием неустойчивого люминесцирующего N-метилакридона, который разлагается с испусканием света (схема 7.9-2). Максимальная интенсивность для таких меток наблюдается обычно в течение 0,4 с с периодом полузатухания 0,9 с.

Это сравнимо с очень медленным испусканием 25 с после инициирования) производных нзолюминола. Люминол и его производные относятся к семейству циклических ацилгидразидов и испускают голубой свет (425 нм) при окислении. Изолюминол имеет более низкий квантовый выход, чем люмннол, но в отличие от люминола этот выход мало изменяется при соединении с белками через аминогруппу. Синтезированы производные изолюминола с разнообразными мостиковыми группами для присоединения к гаптенам, многие из них нацелены на пептидную связь, например, за счет реакции с карбодинмидной или сукцинимидной активацией (схема 7.9-3). Как показано в следующем разделе, хемилюминесцентный контроль значительно усовершенствован за счет

Схема 7.9-2. Хемилюминесцентная реакция с арилакридиновым эфиром.

Конъюгат

Схема 7.9-3. Модифицированная карбодиимидная реакция для конъюгата изолюминола через свободную карбоксильную группу.

Copyright © 2007-2012 Zomber.Ru

Использование материалов сайта возможно при условии указания активной ссылки
Решить химию