Аналитическая химия. Проблемы и подходы. Р. Кельнер

Субстрат, и связанным антителом, не участвует врвакции с ферментом

Рис. 7.9-18. Флуоресцентный иммунный анализ с субстратом-меткой. Антитело, связанное с меченым гаптеном, ингибирует его как субстрат для фермента.

к флуоресцентным измерениям имеет очевидное преимущество более сильного сигнала в сравнении с обычной флуорофорной меткой, поскольку каждая ферментная метка создает много флуоресцирующих молекул.

Однако это справедливо не во всех случаях, например, в анализе, основанном на принципе УФИА, где гаптен маркирован субстратом и образует флуорогенный продукт при ферментативном катализе только тогда, когда не образуется комплекса с антителом (рис. 7.9-18). В этом случае конъюгат (3-галактозилумбеллиферона и гаптен а может участвовать в качестве меченого аналога определяемого вещества в конкурентном анализе с ограниченным, количеством антител. Комплекс антитела с гаптеновьш конъюгатом ингибирован как субстрат для фермента /3-галактозидазы, тогда как оставшийся свободным конъюгат гидролизуется ферментом, образуя флуорогенный продукт.

□ Биолюминесценция предлагает очень чувствительный способ определения ферментной метки.

Щелочная фосфатаза особенно полезна при разработке способов генерации люминесцентного сигнала, поскольку многие ароматические фосфаты при отщеплении фосфатной группы образуют неустойчивый анион, который распадается с испусканием света (например, адамантил-1,2-диоксентанарилфосфат). Однако большинство выполняемых люминесцентных измерений основаны на

Решаем контрольные работы по химии
Срочно нужно решить задачи по химии, выполнить контрольную работу или написать реферат? Тогда вам сюда.

Использование материалов сайта возможно при условии указания активной ссылки
Решить химию

Главная страница сайта	Услуги решения задач по химии
Лекции по химии	Учебник - общая химия